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标题: 细胞治疗CDMO胎牛血清白蛋白如何提取？ [打印本页]

作者: shilu 时间: 2023-3-13 20:10
标题: 细胞治疗CDMO胎牛血清白蛋白如何提取？
　　细胞治疗CDMO胎牛血清白蛋白（BSA），是胎牛血清中的一种球蛋白，一般获取胎牛血清白蛋白，常常运用的方法是加热法。下面一起来看看是怎样获取胎牛血清白蛋白的！
　　一、所需材料
　　胎牛血清以柠檬酸三钠为抗凝剂，血液搜集后随即分别出血浆备用。需要的试剂有血清白蛋白、溴甲酚氯、醋酸纤维素薄膜，别的试剂均为分析纯。获取胎牛血清白蛋白需要准备 LG-6型大容量冷冻离心机，DF-C型电泳仪，UV-754型紫外可见分光光度计，PHS-2型酸度计。
　　二、具体方法
　　白蛋白含量测定，选用溴甲酚氯法，以胎牛血清白蛋白为规范。白蛋白纯度的测定，选用醋酸纤维素薄膜电泳法。吸光度值的测定，用分光光度计直接测定蛋白质溶液在波长为403 nm处的光吸收值，然后折算成浓度为10 g/L时牛血清白蛋白的光吸收值，用A403表明。
　　新鲜抗凝牛血用LC-6型大容量离心机(3000 r/min×30 min)离心分别出血浆，加一定量的蒸馏水稀释，再参与恰当的稳定剂和蛋白沉淀剂，然后按下述方法进行试验处理：
　　1、不一样pH值溶液对白蛋白的收率和质量的影响。在其它条件固定的情况下，试验不一样pH值对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
　　2、不一样加热保温时间对白蛋白的收率和质量的影响。在选定的pH值和其它条件固定的情况下，试验不一样加热保温时间对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
　　3、不一样稀释倍数对白蛋白的收率和质量的影响。在选定的pH值和保温时间及其它条件固定的情况下，试验不一样稀释倍数对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
　　4、不一样加热温度对白蛋白的收率和质量的影响。在其它条件选定的情况下，试验不一样加热温度对白蛋白的收率、纯度及A403值的影响。
　　以上就是胎牛血清白蛋白提取的方法，希望对大家的科研工作有所帮助。

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