基于质量源于设计路线的单抗制品细胞培养工艺研究

zhangzey

　　当前，随着国内生物医药的快速发展，越来越多的生物制药企业的产品研发进入产业化阶段。在生物制药领域里， 质量源于设计（QbD)是一种系统化、结构化、基于科学和风险的药品研发方法，是一种对产品、工艺和分析方法进行科学有效管理的重要工具。目前单抗领域是生物制药行业发展最快，也是相对成熟的领域之一，关于QbD的在单抗制品的开发中应用的报道越来越多， 本文简述了单抗制品细胞培养生产工艺中应用QbD的概念和初步想法。

　　细胞培养生产工艺

　　抗体药物的原液生产大体可分为上游工艺（又称细胞培养）、下游工艺（又称纯化）2个环节，每个环节都拥有其核心技术，这些核心技术环环相扣，形成了抗体药物生产企业的核心竞争力。一个典型的单抗药物的商业化生产流程-上游工艺（细胞培养）一般采用以下步骤：细胞复苏与传代→扩增培养→细胞大规模培养→细胞分离（可属于下游工艺）。

　　细胞复苏与传代

　　单抗生产将种子放置在恒温的水浴锅中，一般温度控制在如35℃左右，预热如30min，将工作细胞库细胞进行解冻复苏，根据工艺要求控制解冻时间，然后将解冻细胞加入至培养基中，离心分离后转入摇瓶中（如250 mL），进行摇瓶传代。注意控制CO 2 浓度、培养温度、培养时间等因素，同时也要根据工艺的要求控制接种的密度，控制细胞活率等要求。将上述的复苏种子细胞按照一定的密度稀释至新摇瓶中（如500 mL/2000mL），控制温度、CO 2 浓度、溶氧浓度、培养温度、培养时间、摇床摇摆速度、pH等因素，逐渐扩增细胞数量至满足一级种子罐的接种要求。