抗体药物研发ELISA试剂盒实验测定标本分化

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　　（1）标本溶血
　　因为各种人为原因引起的标本溶血，均可因红细胞损坏溶解时释放出很多具有过氧化物酶活性的血红蛋白，在以辣根过氧化物酶为符号的ELISA测定中，会导致非特异性显色，搅扰测定成果。为克服上述搅扰效果，抗体药物研发标本收集时必须留意防止溶血。
　　（2）标本受细菌污染
　　因菌体中或许含有内源性辣根过氧化物酶，因而，被细菌污染的标本同溶血标本相同，亦可发生非特异性显色而搅扰测定成果。
　　（3）标本保存不妥
　　在冰箱中保存过久的标本，血清中IgG可聚合成多聚体、AFP可构成二聚体，在间接法ELISA测定中会导致本底过深、甚至造成假阳性；标本放置时间过长（如一天以上），有时抗原或抗体免疫活性削弱，亦可出现假阴性。为克服上述搅扰，ELISA测定的血清标本宜为新鲜收集；如不能立即测定，5天内测定的血清标本可存放于4℃，1周后测定的血清标本应低温冻存；冻存后融解的标本，蛋白质部分浓缩，散布不均，应充分混合后再测定，但混匀时应轻柔，不行激烈振荡。
　　（4）标本凝集不全
　　在没有促凝剂和抗凝剂存在的情况下，正常血液收集后1/2~2h开端凝结，18~24h彻底凝结。临床检验工作中，有时为了争取时间快速检测，常在血液还未开端凝结时即强行离心别离血清，此刻的血清中仍残留部分纤维蛋白原，在ELISA测定过程中能够构成肉眼可见的纤维蛋白块，易造成假阳性成果；这类情况于次日复查时因血凝已彻底，血清中不再有纤维蛋白原存在，故复查成果变为阴性。为防止上述搅扰效果，处理的方法zui好是血液标本收集后必须使其充分凝结后再别离血清，或标本收集时用带别离胶的采血管或于采血管中参加适当的促凝剂。
　　（5）标本管中增加物质的影响
　　抗凝剂（如肝素，EDTA）、酶抑制剂（如NaN3可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性）及快速别离血清的别离胶等均对ELISA测定有一定搅扰效果。经过以上的剖析和总结，临床检验ELISA测定中出现假阳性或假阴性等错误的成果，扫除ELISA试剂盒要素和操作要素，再有便是从标本要素进行剖析，并应采纳相应措施扫除搅扰，从而保证检测成果的准确性。