慢病毒生产ELISA实验稀释血清的步骤

shilu

　　慢病毒生产在实验的过程中,会遇到很多不一样的问题,比如刚开始不知道什么样的ELISA试剂盒好,该选择什么样的ELISA试剂盒来做实验,还有ELISA试剂盒做实验可以稀释血清吗?今天就介绍一下为什么ELISA试剂盒实验要稀释血清.

　　在ELISA试剂盒实验血清为什么要稀释?有两个原因:

　　1、竞争抑制比较明显,应稀释竞争物;

　　2、血清中含有的性腺激素比较低,应该浓缩才对.

　　ELISA试剂盒实验稀释血清的步骤:

　　先把蛋白稀释一定的倍数,比如说10倍、20倍稀释(这样可以大体确定一个参数),将抗原进行一系列稀释包被微量反应板,再用一定稀释度的阳性参考血清和阴性参考血清进行孵育后洗涤,再加酶结合物进行反应,经孵育洗涤后,加底物溶液显色,终止反应后分别测定O.D值,选择O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为最适包被浓度.一般总是要选择那个O.D值稍大于1.0,而不选择小于1.0的抗原浓度.阴性参考血清O.D值要求<0.1-0.2.也就是要求阳性参考血清和阴性参考血清的O.D值有明显差别.